Cymysgedd Meistr Colormetric RT-LAMP HCB5204A
Mae'r cynnyrch hwn yn cynnwys byffer adwaith, RT-Enzymes Mix (Bst DNA polymerase a gwres-gwrthsefyll transcriptase gwrthdro), Amddiffynyddion lyophilized a chydrannau lliw cromogenig.I'w ddefnyddio, dim ond defnyddio Buffer, mae'r ensym adwaith a primer yn cael eu cymysgu a'u hychwanegu at y templed;gall ychwanegu protectant lyophilized fod yn syth.Fe'i cysylltwyd â lyophilizer a'i lyoffileiddio, a dim ond y paent preimio a'r templedi a ychwanegwyd pan gânt eu defnyddio.Mae'r pecyn hwn yn darparu canfyddiad gweledol cyflym a chlir o ymhelaethu, y mae adwaith negyddol yn cael ei nodi mewn coch ac adwaith cadarnhaol yn cael ei nodi gan newid i felyn.
Cydran
| Cydran | HCB5204A-01 | HCB5204A-02 | HCB5204A-03 |
| Clustog Chwyddiant â Chyfryngu Dolen (gyda lliw) | 0.96 ml | 4.80 ml × 2 | 9.60 ml × 10 |
| Cymysgedd RT-Ensymau | 270 μL | 2.70 ml | 2.70 ml × 10 |
| Amddiffynnydd lyophilized | 0.96 ml × 2 | 9.60 ml × 2 | 9.60 ml × 20 |
Ceisiadau
Ar gyfer ymhelaethiad isothermol DNA neu RNA.
Amodau Storio
Wedi'i gludo â rhew sych, wedi'i storio ar -25 ~ -15 ℃.Osgoi rhewi-dadmer yn aml, mae'r cynnyrch yn ddilys am 12 mis.
Protocol
1.Dadmer y byffer adwaith i'w ddefnyddio ar dymheredd ystafell.Vortex yn fyr neu tiwbiau gwrthdro sawl gwaith i gymysgu'n drylwyr, yna centrifuge i gasglu'r hylif i waelod y tiwb.
2.Paratoi system adwaith.Gellir paratoi'r adweithydd hwn mewn dwy system adwaith, cymysgedd adwaith hylif a chymysgedd system lyophilized.
1) Paratoi cymysgedd adwaith hylif
| Cydran | Cyfrol |
| Clustog Chwyddiant â Chyfryngu Dolen (gyda lliw) | 10 μL |
| Cymysgedd RT-Ensymau | 2.8 μL |
| Cymysgedd Primer 10 ×a | 5 μL |
| Templedi DNA/ RNA b | × μL |
| Dŵr Di-Niwclews | Hyd at 50 μL |
2) cymysgedd system lyophilization
① Paratoi cymysgedd lyophilized
| Cydran | Cyfrol |
| Clustog Chwyddiant â Chyfryngu Dolen (gyda lliw) | 10 μL |
| Amddiffynnydd lyophilized | 20 μL |
| Cymysgedd RT-Ensymau | 2.8 μL |
| Dŵr Di-Niwclews | Hyd at 50 μL |
② Lyophilization: Cafodd y Cymysgedd a baratowyd ei lyophilized mewn system 50μL
③ Paratoi cymysgedd adwaith
| Cydran | Cyfrol |
| Cymysgedd lyophilized | 1 darn |
| Cymysgedd Primer 10 ×a | 5 μL |
| Templedi DNA/ RNA b | × μL |
| Dŵr Di-Niwclews | Hyd at 50 μL |
Nodiadau:
1) a.10×Primer Mix: 16 μM FIP/BIP, 2 μM F3/B3, 4 μM Dolen F/B;
2) b.Argymhellir DEPC (hydawdd mewn dŵr) ar gyfer templ asid niwclëig.
1.Deorwch ar 65°C am 30-45 munud, y gellir ei ymestyn yn briodol yn ôl amser ymateb newid lliw.
2.Yn ôl y llygad noeth, roedd melyn yn bositif a choch yn negyddol.
Nodiadau
1.Gall halen ymddangos ar waelod y tiwb clustogi, fortecs yn fyr neu diwbiau gwrthdro sawl gwaith i gymysgu'n drylwyr ar dymheredd ystafell.
2.Gellir optimeiddio tymheredd yr adwaith rhwng 62 ℃ a 68 ℃ yn ôl cyflwr paent preimio.
3.Ni ddylai'r adweithyddion wedi'u pecynnu fod yn agored i aer am amser hir.
4.Mae'r adwaith afliwiad coch a melyn yn dibynnu ar newid pH y system adwaith, peidiwch â defnyddio'r toddiant storio asid niwclëig Tris sy'n cynnwys, argymhellir defnyddio ddH2O asid niwclëig wedi'i storio;
5.Dylid safoni'r arbrawf, gan gynnwys paratoi'r system adwaith, lyophilization, a phrosesu sampl a phroses ychwanegu sampl;
6.Er mwyn osgoi halogiad, argymhellir paratoi'r system adwaith mewn mainc uwch-lân, mewn eraill Ychwanegu templedi i cwfl mygdarth yr ystafell er mwyn osgoi ymyrraeth gadarnhaol ffug.
