Cymysgedd Meistr 2 × PCR (heb Llif)
Mae PCR Master Mix yn fath o ddatrysiad premixed PCR confensiynol sy'n barod i'w ddefnyddio, gan gynnwys Taq DNA Polymerase, cymysgedd dNTP MgCl2 a byffer wedi'i optimeiddio.Yn ystod yr adwaith, dim ond y primer a'r templed y gellir eu hychwanegu ar gyfer ymhelaethu, sy'n symleiddio camau gweithredu'r arbrawf yn fawr.Mae'r cynnyrch hwn yn cynnwys sefydlogwyr rhagorol a gellir ei storio am 3 mis ar 4 ℃.Mae gan y cynnyrch PCR allwthiad 3′-dA a gellir ei glonio'n hawdd i fector T.
Amodau Storio
Dylid storio'r cynnyrch ar -25 ℃ ~ -15 ℃ am ddwy flynedd.
Manylebau
| Ffyddlondeb (vs.Taq) | 1 × |
| Cychwyn Poeth | No |
| Bargod | 3′-A |
| Polymerase | Polymeras DNA Taq |
| Fformat Ymateb | SuperMix neu Master Mix |
| Cyflymder Ymateb | Safonol |
| Math o Gynnyrch | Cymysgedd Meistr PCR (2×) |
Cyfarwyddiadau
1 .System Adwaith
| Cydrannau | Maint (μL) |
| Templed DNA | Addas |
| Preimiwr 1 (10 μmol/L) | 2 |
| Preimiwr 2 (10 μmol/L) | 2 |
| Cymysgedd Meistr PCR | 25 |
| ddH2O | I 50 |
2.Protocol Ymhelaethu
| Camau beicio | Tymheredd (°C) | Amser | Beiciau |
| Cyn-denatureiddio | 94 ℃ | 5 munud | 1 |
| Dadnatureiddio | 94 ℃ | 30 eiliad | 35 |
| Anelio | 50-60 ℃ | 30 eiliad | |
| Estyniad | 72 ℃ | 30-60 eiliad/kb | |
| Estyniad Terfynol | 72 ℃ | 10 munud | 1 |
Nodiadau:
1) Defnydd templed: 50-200 ng DNA genomig;0.1- 10 ng DNA plasmid.
2) Mg2+crynodiad: Mae'r cynnyrch hwn yn cynnwys 3 mM o MgCl2 sy'n addas ar gyfer y rhan fwyaf o adweithiau PCR.
3) tymheredd anelio: Cyfeiriwch at werth Tm damcaniaethol o Primers.Gellir gosod y tymheredd anelio i 2-5 ℃ yn is na gwerth damcaniaethol y paent preimio.
4) Amser ymestyn: Ar gyfer adnabod moleciwlaidd, argymhellir 30 eiliad / kb.Ar gyfer clonio genynnau, 60sec/kb yn cael ei argymell.
Nodiadau
1 .Er eich diogelwch a'ch iechyd, gwisgwch gotiau labordy a menig tafladwy i'w defnyddio.
2 .At ddefnydd ymchwil yn unig!
