5 × Neoscript Fast RT-qPCR Premix plus-UNG

Cat Rhif: HCB5142A

Mae Neoscript Fast RT Premix-UNG (Probe qRT-PCR) yn gymysgedd hynod sefydlog sy'n seiliedig ar stiliwr un-tiwb sy'n addas ar gyfer trawsgrifio gwrthdro un cam a PCR meintiol (qRT-PCR).Mae'n cefnogi rhag-gymysgu paent preimio a stilwyr ac yn aros yn sefydlog ar ôl storio amser hir ar dymheredd isel.Gellir ychwanegu'r sampl sydd i'w brofi yn uniongyrchol wrth ei ddefnyddio, heb agoriad tiwb / gweithrediad pibellau ychwanegol.Mae'r cynnyrch hwn yn darparu cydrannau, ee polymeras DNA cychwyn poeth, M-MLV, glycosylase DNA uracil gwres-labile (TS-UNG), Atalydd RNase, MgCl₂, dNTPs (gyda dUTP yn lle dTTP), a sefydlogwyr.Gyda'r ymhelaethiad cyflym a addaswyd yn enetig transcriptase gwrthdroi a DNA polymeras, mae'n bosibl cwblhau'r ymhelaethiad PCR o fewn 20-40 munud.Mae'r adweithydd hwn yn defnyddio byffer arbennig ar gyfer qPCR gydag ensymau cymysg o ensym mwyhau gwrth-ataliol ac ensym UNG.Felly, gall gael ymhelaethiad da o enynnau targed ac atal ymhelaethu ffug a achosir gan PCR llygredd gweddilliol ac aerosol.Mae'r adweithydd hwn yn gydnaws â'r rhan fwyaf o offerynnau PCR meintiol fflworoleuedd gan weithgynhyrchwyr fel Applied Biosystems, Eppendorf, Bio-Rad a Roche.

Cydran

1 .Cymysgedd RTase/UNG Cyflym Neoscript 25 ×

2 .Clustog Premix RT Cyflym 5 × Neoscript (dUTP)

Amodau Storio

Dylid cadw'r holl gydrannau ar -20 ℃ ar gyfer storio hirdymor a 4 ℃ am hyd at 3 mis.Cymysgwch yn drylwyr ar ôl dadmer a centrifuge cyn ei ddefnyddio.Osgoi rhewi-dadmer yn aml.

qRT-PCR Paratoi System Adwaith

1) a.The crynodiad terfynol o preimio fel arfer yn 0.2μM.I gael canlyniadau gwell, gellir optimeiddio'r crynodiad preimio o fewn yr ystod o 0.2-1μM.Yn gyffredinol, gellir optimeiddio crynodiad y stiliwr o fewn yr ystod o 0.1-0.3μM.

2) b.Wrth ddefnyddio Gweithdrefn PCR cyflym, gall cynyddu crynodiad paent preimio a stilwyr arwain at well canlyniadau mwyhau, a dylid optimeiddio eu cymhareb yn unol â hynny.

3) Mae gwahanol fathau o samplau yn cynnwys gwahanol fathau a chynnwys atalydd a chopi nifer y genyn targed.Dylid ystyried cyfaint y sampl yn ôl cyflwr gwirioneddol.Gwnewch wanhad o'r sampl gyda dŵr heb niwcleas neu Byffer TE, os oes angen.

Adwaith Camodau

Rheoli Ansawdd

1.Canfod swyddogaeth: sensitifrwydd, penodoldeb ac ailadroddadwyedd qPCR.

2 .Dim gweithgaredd niwcleas alldarddol: dim llygredd endonuclease alldarddol ac exonuclease.

Nodiadau

1 .Nid yw cyfradd chwyddo DNA polymeras cyflym yn llai na 1kb/10s.Mae gan wahanol offerynnau PCR gyflymder gwresogi ac oeri gwahanol, dulliau rheoli tymheredd a dargludedd thermol, ac felly mae'n hanfodol optimeiddio'ch crynodiad preimio / stiliwr a rhedeg ar y cyd â'ch offeryn PCR cyflym penodol.

2 .Mae'r cynnyrch hwn yn perfformio'n eang, ac mae'n addas ar gyfer diagnosis moleciwlaidd sensitifrwydd uchel.Argymhellir dull PCR tri cham ar gyfer paent preimio â thymheredd anelio isel neu ar gyfer ymhelaethu ar ddarnau hir dros 200 bp.

3.Gan fod gan wahanol amplicons wahanol effeithlonrwydd defnydd o dUTP a sensitifrwydd gwahanol i UNG, dylid optimeiddio'r adweithyddion os bydd y sensitifrwydd canfod yn lleihau wrth ddefnyddio system UNG.Cysylltwch â ni am gymorth technegol os oes angen.

4.Er mwyn osgoi ymhelaethu ar gynhyrchion PCR sy'n cael eu cario drosodd, mae angen ardal arbrofol benodol a phibed ar gyfer ymhelaethu.Gweithredu gyda menig a newid yn aml a pheidiwch ag agor y tiwb PCR ar ôl ymhelaethu.