Atalydd Rnase (rhydd o glycerol)
Mae atalydd RNase Murine yn atalydd RNase murine ailgyfunol wedi'i fynegi a'i buro o E.coli.Mae'n clymu i RNase A, B neu C mewn cymhareb 1:1 trwy fondio di-cofalent, a thrwy hynny atal gweithgaredd y tri ensym ac amddiffyn RNA rhag diraddio.Fodd bynnag, nid yw'n effeithiol yn erbyn RNase 1, RNase T1, S1 Nuclease, RNase H neu RNase o Aspergillus.Profwyd atalydd RNase Murine gan RT-PCR, RT-qPCR ac IVT mRNA, ac roedd yn gydnaws â thrawsgrifiadau gwrthdro masnachol amrywiol, polymerasau DNA a pholymerasau RNA.
O'i gymharu ag atalyddion RNase dynol, nid yw atalydd RNase murine yn cynnwys dau gystein sy'n sensitif iawn i ocsidiad sy'n achosi anactifadu'r atalydd.Sy'n ei gwneud yn sefydlog ar grynodiadau isel o DTT (llai nag 1 mM).Mae'r nodwedd hon yn ei gwneud yn addas i'w defnyddio mewn adweithiau lle mae crynodiadau uchel o DTT yn niweidiol i'r adwaith (ee RT-PCR amser real).
Acais
Gellir defnyddio'r cynnyrch hwn yn eang mewn unrhyw arbrawf lle mae ymyrraeth RNase yn bosibl er mwyn osgoi diraddio RNA, megis:
synthesis cDNA 1.First-strand, RT-PCR, RT-qPCR, ac ati;
2.Amddiffyn RNA rhag diraddio mewn trawsgrifiad/cyfieithiad in-vitro (ee atgynhyrchu firaol in vitro);
3.Inhibition o weithgaredd RNase yn ystod ynysu RNA a phuro.
Amodau Storio
Storio ar -25 ～-15 ℃;
Cylchoedd rhewi-dadmer ≤ 5 gwaith;
Yn ddilys am 1 mlynedd.
Diffiniad uned
Diffinnir un uned fel y swm o Atalydd RNase sydd ei angen i atal gweithgaredd 5 ng o RNase A o 50%.
Pwysau moleciwlaidd
Mae Atalydd RNase (di-Glyserol) yn brotein 50 kDa.
Rheoli ansawdd
Exonuclease Gweithgaredd:
Arweiniodd deori 40 U o ensym ag 1 μg λ-Hind III dreulio DNA am 16 awr ar 37°C at ddim diraddiad canfyddadwy o'r DNA fel y'i pennwyd gan electrofforesis gel.
Gweithgaredd Endonuclease:
Arweiniodd deori 40 U o ensym ag 1 μg λ DNA am 16 awr ar 37°C at ddim diraddiad canfyddadwy o'r DNA fel y'i pennwyd gan electrofforesis gel.
Nickio Gweithgaredd:
Arweiniodd deori 40 U o ensym ag 1 μg pBR322 am 16 awr ar 37 ℃ at ddim diraddiad canfyddadwy o'r DNA fel y'i pennwyd gan electrofforesis gel.
RNase Gweithgaredd:
Arweiniodd deori 40 U o ensym gyda 1.6 μg MS2 RNA am 4 awr ar 37 ℃ at ddim diraddio canfyddadwy o'r RNA fel y'i pennwyd gan electrofforesis gel.
E.DNA coli:
Mae TaqMan qPCR yn canfod 40 U o Ensym.Mae'r DNA E.coli yn ≤ 0. 1pg/40U.
Notes
1.Peidiwch ag ysgwyd neu droi'n dreisgar i atal anactifadu ensymau.
Mae atalydd 2.RNase yn weithredol ar dymheredd sy'n amrywio o 25 ℃ i 55 ℃ ac mae wedi'i anactifadu ar ≥65 ℃.
3. Nid yw gweithgaredd RNase H, RNase 1, ac RNase T1 yn cael ei atal.
4. Mae'r ystod pH ar gyfer atal gweithgaredd RNase yn eang (actif ar pH 5-9), gan arddangos gweithgaredd uchaf ar pH 7-8.
