Cyfyngiad BsaI Endonuclease
Disgrifiad
Mae'r ensym cyfyngu BsaI yn endonuclease cyfyngiad math II sy'n deillio o'r protein ailgyfunol sydd wedi'i amgodio gan y genyn BspQI yn Bacillus sphaericus a fynegir gan E.coli.Defnyddir endonucleases cyfyngu yn eang mewn mapio genynnau, clonio a meysydd eraill.Mae'r ensym hwn yn torri DNA yn gyflym ar gyfer llinoliad genynnau effeithlon Mae Bsa I , sef endonuclease cyfyngu endonuclease cyfyngiad IIs, yn deillio o straen E. coli ailgyfunol sy'n cario'r genyn BsaI wedi'i glonio a'i addasu o Bacillus stearothermophilus.sydd â'r un penodoldeb ag ensymau brodorol a llai o weithgaredd seren.Mae ei ddilyniant cydnabyddiaeth a safleoedd holltiad fel a ganlyn:
5'······GGTCTC(N)·······3'
3'·····CCAGAG(NNNNNN)······5'
Strwythur Cemegol
Nodweddion Cynnyrch
• Mae gan yr endonuclease cyfyngiad weithgaredd ensymatig uchel ac mae'n cwblhau adwaith treuliad yn gyflym.
• Gweithgaredd endonuclease isel amhenodol i sicrhau torri "scalpel" manwl gywir.
• Dim system BSA, sy'n lleihau llygredd ffynhonnell gwres.
Manyleb
| Eitemau Prawf | Manylebau |
| Gweithgaredd Ensym | 20 U/µL |
| Purdeb (SDS-PAGE) | ≥95% |
| Rnase | Dim wedi'i ganfod |
| Gweithgaredd DNA Amhenodol | Heb ei ganfod |
| Gweithgaredd Seren | Heb ei ganfod |
| Ligation a Recutating | Ar ôl treulio, gellir clymu darnau DNA.A gellir torri'r darnau clymu hyn gyda Bsal. |
| Endotocsinau (prawf LAL) | ≤10 UE/mg |
| E.Coli DNA | ≤1 Copi/2U |
Rheoli ansawdd
Purdeb ≥ 95%, Dim DNase, gweithgaredd RNase, Gweddillion DNA gwesteiwr ≤ 100pg/mg, gweddillion protein gwesteiwr ≤ -50ppm, gweddillion endotocsin ≤ 10EU/mg, Dim gweithgaredd proteas, di-haint, heb mycoplasma
Cais
Treuliwch y plasmid i baratoi darn DNA llinol ar ddiwedd Poly (A/T/C/G);
Llinelloli templed plasmid cyn trawsgrifio in vitro;
Crynhoad cyfyngiad;
Diffiniad Uned
Diffinnir un uned fel swm yr ensym sydd ei angen i dreulio 1 µg o DNA rheolaeth fewnol mewn 1 awr ar 37°C mewn cyfanswm cyfaint adwaith o 50 µL
Cludo a storio
Cludiant:Wedi'i gludo o dan -15 ° C
Storio:Storio ar -25 ~ -15 ° C
Argymhellir ail-brawf Bywyd:1 flwyddyn
