Ffosffatas alcalin (ALP)
Disgrifiad
Mae ffosffatase alcalïaidd yn deillio o straen E. coli ailgyfunol sy'n cario'r genyn TAB5.Mae’r ensym yn cataleiddio dadffosfforyleiddiad pennau 5’ a 3’ ffosffomonoesterau DNA a RNA.Hefyd, mae'n hydrolysu ribos, yn ogystal â deoxyribonnucleoside triphosphates (NTPs a dNTPs).Mae Ffosffatas Alcalin TAB5 yn gweithredu ar bennau 5´ ymwthiol, 5´ cilfachog a di-fin.Gellir defnyddio'r Phosphatase mewn llawer o gymwysiadau bioleg foleciwlaidd, megis clonio neu labelu diwedd stiliwr i ddileu pennau ffosfforyleiddiad DNA neu RNA.Mewn arbrofion clonio, mae dephosphorylation yn atal y DNA plasmid llinol rhag hunan-ligation.Gall hefyd ddiraddio dNTPs anghorfforedig mewn adweithiau PCR i baratoi templed ar gyfer dilyniannu DNA.Mae'r ensym yn cael ei anactifadu'n llwyr ac yn anadferadwy trwy wresogi ar 70 ° C am 5 munud, gan olygu nad oes angen tynnu'r ffosffatas cyn clymu neu labelu terfynol.
Defnydd
Gall phosphatase 1.Alkaline ynghyd â phroteinau (gwrthgyrff, streptavidin ac ati,) nodi moleciwlau targed yn benodol, a gellir eu defnyddio mewn canfod ELISA, WB a histocemegol;
Gellir defnyddio phosphatase 2.Alkaline i dephosphorize y 5 '-terminal o DNA neu RNA i atal hunan-gysylltu;
3.Gellir labelu'r DNA neu'r RNA dephosphorylated uchod gan ffosffadau radio-label (trwy T4 poly-nucleotide kinase)
Strwythur Cemegol
Manyleb
| Eitemau Prawf | Manylebau |
| Gweithgaredd Ensym | 5U/μL |
| Gweithgaredd Endonuclease | Heb ei ganfod |
| Gweithgaredd Exonuuclease | Heb ei ganfod |
| Gweithgaredd Nicking | Heb ei ganfod |
| Gweithgaredd RNase | Heb ei ganfod |
| DNA E.coli | ≤1copi/5U |
| Endotocsin | Prawf LAL, ≤10EU/mg |
| Purdeb | ≥95% |
Cludo a storio
Cludiant:Amgylchynol
Storio:Storio ar 2-8 ° C
Argymhellir ail-brawfBywyd:2 flwyddyn
