Cyffredinol SYBR GWYRDD qPCR Premix (Glas)

Cat Rhif: HCB5041B

Mae Universal Blue qPCR Master Mix (Dye Based) yn rhag-ateb ar gyfer ymhelaethiad meintiol PCR 2 × amser real a nodweddir gan sensitifrwydd a phenodoldeb uchel, mae'n las ei liw, ac mae'n cael effaith olrhain adio sampl.Mae'r gydran graidd Taq DNA polymeras yn defnyddio cychwyn poeth gwrthgyrff i atal ymhelaethu amhenodol yn effeithiol oherwydd anelio paent preimio wrth baratoi sampl.Ar yr un pryd, mae'r fformiwla yn ychwanegu'r ffactorau hyrwyddo i wella effeithlonrwydd ymhelaethu adwaith PCR a chydraddoli ymhelaethiad genynnau â gwahanol gynnwys GC (30 ~ 70%), fel y gall PCR meintiol gael perthynas llinol dda mewn meintiol eang. rhanbarth.Mae'r cynnyrch hwn yn cynnwys ROX Passive Reference Dye arbennig, sy'n berthnasol i'r mwyafrif o offerynnau qPCR.Nid oes angen addasu crynodiad ROX ar wahanol offerynnau.Nid oes ond angen ychwanegu paent preimio a thempledi i baratoi'r system adwaith ar gyfer ymhelaethu.

Cydrannau

Cymysgedd Meistr qPCR Universal Blue

Amodau storio

Mae'r cynnyrch yn cael ei gludo gyda phecynnau iâ a gellir ei storio ar -25 ℃ ~ -15 ℃ am 18 mis.Mae angen osgoi arbelydru golau cryf wrth storio neu baratoi'r system adwaith.

Manyleb

Cyfarwyddiadau

System 1.Reaction

[Nodyn]: Cymysgwch yn drylwyr cyn ei ddefnyddio i osgoi swigod gormodol rhag ysgwyd yn egnïol.

a) Crynodiad primer: Y crynodiad preimiwr terfynol yw 0.2μmol/L, a gellir ei addasu hefyd rhwng 0.1 a 1.0μmol/L fel y bo'n briodol.

b) Crynodiad templed: Os yw'r templed yn ddatrysiad stoc cDNA heb ei wanhau, ni ddylai'r cyfaint a ddefnyddir fod yn fwy na 1/10 o gyfanswm cyfaint yr adwaith qPCR.

c) Gwanhau templed: Argymhellir gwanhau'r hydoddiant stoc cDNA 5-10 gwaith.Mae'r swm gorau posibl o dempled wedi'i ychwanegu yn well pan fydd y gwerth Ct a geir trwy ymhelaethu yn 20-30 cylch.

d) System adwaith: Argymhellir defnyddio 20μL neu 50μL i sicrhau effeithiolrwydd ac ailadroddadwyedd ymhelaethu genynnau targed.

e) Paratoi'r system: Paratowch yn y fainc hynod lân a defnyddiwch y tomenni a'r tiwbiau adwaith heb weddillion niwcleas;argymhellir defnyddio'r awgrymiadau gyda chetris hidlo.Osgoi croeshalogi a halogiad erosol.

2.Rhaglen ymateb

Rhaglen Safonol

Rhaglen Gyflym

[Nodyn]: Mae'r rhaglen gyflym yn addas ar gyfer y mwyafrif helaeth o enynnau, a gellir rhoi cynnig ar raglenni safonol ar gyfer genynnau strwythur eilaidd cymhleth unigol.

a) Tymheredd ac amser anelio: Addaswch yn ôl hyd y preimiwr a'r genyn targed.

b) Caffael signal fflworoleuedd (★): Gosodwch y weithdrefn arbrofol yn unol â'r gofynion yn y cyfarwyddiadau ar gyfer defnyddio'r offeryn.

c) Cromlin toddi: Gellir defnyddio'r rhaglen ddiofyn offeryn fel arfer.

3. Dadansoddiad Canlyniad 

Roedd angen o leiaf dri atgynhyrchiad biolegol ar gyfer arbrofion meintiol.Ar ôl yr adwaith, mae angen cadarnhau'r gromlin ymhelaethu a'r gromlin doddi.

3.1 Cromlin ymhelaethu:

Mae'r gromlin ymhelaethu safonol yn siâp S.Mae dadansoddiad meintiol yn fwyaf cywir pan fydd gwerth Ct yn disgyn rhwng 20 a 30. Os yw gwerth Ct yn llai na 10, mae angen gwanhau'r templed a chynnal y prawf eto.Pan fydd gwerth Ct rhwng 30-35, mae angen cynyddu crynodiad y templed neu gyfaint y system adwaith, er mwyn gwella effeithlonrwydd ymhelaethu a sicrhau cywirdeb y dadansoddiad canlyniad.Pan fo gwerth Ct yn fwy na 35, ni all canlyniadau'r prawf ddadansoddi mynegiant y genyn yn feintiol, ond gellir eu defnyddio ar gyfer dadansoddiad ansoddol.

3.2 Cromlin toddi:

Mae brig sengl y gromlin doddi yn dangos bod penodoldeb yr adwaith yn dda a gellir cynnal dadansoddiad meintiol;os yw'r gromlin doddi yn dangos copaon dwbl neu luosog, ni ellir cynnal dadansoddiad meintiol.Mae'r gromlin toddi yn dangos copaon dwbl, ac mae angen barnu a yw'r brig nad yw'n darged yn primer dimer neu ymhelaethiad amhenodol gan electrofforesis gel agarose DNA.Os yw'n dimer paent preimio, argymhellir lleihau'r crynodiad paent preimio neu ailgynllunio paent preimio gydag effeithlonrwydd ymhelaethu uchel.Os yw'n ymhelaethiad amhenodol, cynyddwch y tymheredd anelio, neu ailgynllunio'r paent preimio yn benodol.

Nodiadau

Gwisgwch y PPE angenrheidiol, cot labordy a menig o'r fath, i sicrhau eich iechyd a diogelwch!

Mae'r cynnyrch hwn at ddefnydd ymchwil YN UNIG!