2 × HiF Taq ynghyd â Master Mix
Cat Rhif: HCR2014B
Mae HIF Taq a Master Mix (With Dye) yn ddatrysiad 2 × rhag-gymysg parod i'w ddefnyddio sy'n cynnwys Plus HIF DNA Polymerase, dNTPs, a byffer wedi'i optimeiddio.Mae dau wrthgorff monoclonaidd ar dymheredd ystafell sy'n atal gweithgaredd polymeras a gweithgaredd exonuclease 3′→5′ yn cael eu hychwanegu at y prif gymysgedd ar gyfer PCR Cychwyn Poeth hawdd a phenodol iawn.Mae'r ffactor estyn yn cael ei ychwanegu at y prif gymysgedd i roi cynhwysedd helaethiad darn hir i'r ensym, gall hyd yr ymhelaethiad fod hyd at 13 kb, mae gan yr ensym weithgaredd DNA polymeras 5′→3′ a 3′→5′ gweithgaredd exonuclease, mae ei ffyddlondeb 83 gwaith yn fwy na Taq DNA polymeras, sydd 9 gwaith yn fwy na DNA polymeras cyffredin.Mae'n addas ar gyfer ymhelaethu ar dempledi cymhleth, mae'r cynnyrch ymhelaethu yn ddi-ben-draw.
Mae gan 2 × HIF Taq plus Master Mix (Gyda Dye) fanteision cyflym a hawdd, sensitifrwydd uchel, penodoldeb cryf, sefydlogrwydd da, ac ati, dim ond paent preimio a thempledi y mae angen i'r system adwaith ei ychwanegu, a gellir ei chwyddo gan ddau- protocol cam, gan symleiddio'r camau arbrofol ac arbed amser.Mae'r cynnyrch hwn yn cynnwys llifynnau dangosydd electrofforesis, a gellir defnyddio cynhyrchion PCR yn uniongyrchol ar gyfer electrofforesis.Yn ogystal, mae'r cynnyrch hefyd yn cynnwys asiant amddiffynnol penodol, fel y gall y prif gymysgedd gynnal gweithgaredd sefydlog ar ôl rhewi-dadmer dro ar ôl tro.
Amodau Storio
Dylid storio cynhyrchion ar -25 ~ -15 ℃ am 1 flwyddyn.
Manylebau
Manyleb cynnyrch | Cymysgedd Meistr |
Crynodiad | 2 × |
Cychwyn Poeth | Cychwyn Poeth adeiledig |
Bargod | Gwlychu |
Cyflymder ymateb | Cyflym |
Maint (Cynnyrch Terfynol) | Hyd at 13kb |
Amodau cludiant | Rhew sych |
Math o gynnyrch | Rhag-gymysgeddau PCR ffyddlondeb uchel |
Cyfarwyddiadau
1 .System Ymateb PCR
Cydrannau | Cyfaint (μL) |
Templed DNA | Addas |
Preimio ymlaen (10 μmol/L) | 2.5 |
Preimiwr Gwrthdroi (10 μmol/L) | 2.5 |
2 × HIF Taq ynghyd â Master Mix | 25 |
ddH2O | i 50 |
2 .Argymhellir defnyddio gwahanol dempledi
Math o dempled | Chwyddo darnau o 1kb i 10 kb |
DNA genomig | 50ng-200 ng |
DNA plasmid neu firaol | 10pg-20ng |
cDNA | 1-2.5 µL (Peidiwch â bod yn fwy na 10% o gyfaint adwaith terfynol PCR) |
3.Protocol Ymhelaethu
1) Protocol Dau Gam (templed cymhlethdod)
Cam beicio | Temp. | Amser | Beiciau |
Dadnatureiddio cychwynnol | 98 ℃ | 3 mun | 1 |
Dadnatureiddio | 98 ℃ | 10 eiliad | 30-35 |
Estyniad | 68 ℃ | 30 eiliad/kb | |
Estyniad terfynol | 72 ℃ | 5 mun | 1 |
2) Protocol Tri Cham (protocol rheolaidd)
Cam beicio | Temp. | Amser | Beiciau |
Dadnatureiddio cychwynnol | 98 ℃ | 3 mun | 1 |
Dadnatureiddio | 98 ℃ | 10 eiliad | 30-35 |
Anelio | 60 ℃ | 20 eiliad | |
Estyniad | 72 ℃ | 30 eiliad/kb | |
Estyniad terfynol | 72 ℃ | 5 mun | 1 |
3) Protocol Graddiant Annealing (templed cymhlethdod)
Cam beicio | Tymheredd | Amser | Beiciau |
Dadnatureiddio cychwynnol | 98 ℃ | 3 mun | 1 |
Dadnatureiddio | 98 ℃ | 10 eiliad | 15 (Gostyngiad o 1 ℃ fesul cylch) |
Anelio graddiant | 70-55 ℃ | 20 eiliad | |
Estyniad | 72 ℃ | 30 eiliad/kb | |
Dadnatureiddio | 98 ℃ | 10 eiliad |
20 |
Anelio | 55 ℃ | 20 eiliad | |
Estyniad | 72 ℃ | 30 eiliad/kb | |
Estyniad terfynol | 72 ℃ | 5 mun | 1 |
Nodweddion o dan brotocol ymhelaethu gwahanol
Protocol | Dau-Gam | Tri cham | Anelio graddiant |
Spec. | cyflym | canolig | araf |
Penodoldeb | uchel | canolig | uchel |
Cnwd PCR | canolig | uchel | canolig |
Cyfradd canfod | uchel | canolig | uchel |
Nodiadau
Gwisgwch y PPE angenrheidiol, cot labordy a menig o'r fath, i sicrhau eich iechyd a diogelwch!