Rnase A
Mae Ribonuclease A(RNAseA) yn polypeptid un edefyn sy'n cynnwys 4 bond desylffid gyda phwysau moleciwlaidd o tua 13.7 kDa.RNase Ais yn endoribonuclease sy'n diraddio RNA un edefyn yn benodol ar weddillion C ac U.Yn benodol, mae'r holltiad yn cydnabod y bond ffosffodiester a ffurfiwyd gan 5'-ribose niwcleotid a'r grŵp ffosffad ar ribos 3' y niwcleotid pyrimidine cyfagos, fel bod y ffosffadau 2,3'-Cyclic yn cael eu hydrolysu i'r 3 cyfatebol 'ffosffadau niwcleosid (ee,pG-pG-pC-pA-pG yn cael ei hollti gan RNase A i gynhyrchu pG-pG-pCp ac A-PG).RNase A yw'r mwyaf gweithredol wrth hollti RNA un edefyn.Y crynodiad gweithio a argymhellir yw 1-100 μ G/mL, sy'n gydnaws â systemau adwaith amrywiol.Gellir defnyddio crynodiad halen isel (0-100 mM NaCl) i dorri cadwyni RNA un-sownd, RNA dwbl, a chadwyni RNA a ffurfiwyd gan hybridization RNA-DNA.
Fodd bynnag, ar grynodiad halen uchel (≥0.3 M), mae RNAse A yn unig yn hollti RNA un edefyn yn benodol.
Mae RNase A yn cael ei ddefnyddio amlaf i dynnu RNA wrth baratoi DNA plasmid neu DNA genomig.Gall p'un a yw DNA yn weithredol ai peidio yn ystod y broses baratoi effeithio'n hawdd ar yr adwaith.Gellir defnyddio'r dull traddodiadol o ferwi mewn baddon dŵr i anactifadu gweithgaredd DNA.Nid yw'r cynnyrch hwn yn cynnwys DNase a proteas, ac nid oes angen triniaeth wres arno cyn ei ddefnyddio.Yn ogystal, gellir defnyddio'r cynnyrch hwn hefyd mewn arbrofion bioleg moleciwlaidd megis dadansoddiad amddiffyn RNase a dadansoddiad dilyniant RNA.
Amodau storio
Dylid storio'r cynnyrch ar -25 ℃ ~ - 15 ℃ am 2 flynedd.
Manylebau
| Ymddangosiad | Powdr |
| Nifer | 100mg / 1g |
| Math o gynnyrch | RNase A |
Cyfarwyddiadau
Dyma un o'r dulliau cyffredin ar gyfer paratoi datrysiad storio RNase A.Gellir ei baratoi hefydtrwy ddulliau eraill yn ôl y dulliau traddodiadol yn y labordy neu lenyddiaeth gyfeirio (felhydoddi'n uniongyrchol mewn hydoddiant 10 mM Tris-HCl, pH 7.5 neu Tris-NaCl)
1. Defnyddiwch asetad sodiwm 10 mM (pH 5.2) i baratoi 10 mg/mL o hydoddiant storio RNase A.
2. Gwresogi ar 100 ℃ am 15 munud.
3. Oer i dymheredd ystafell, ychwanegu 1/10 cyfaint o 1 M Tris-HCl (pH 7.4), addasu ei pH i 7.4 (ar gyferEr enghraifft, ychwanegwch 500 ml o doddiant storio RNase 10 mg/mL 1 M Tris-HCl, pH7.4).
4. Wedi'i is-becynnu ar -20 ℃ ar gyfer storio wedi'i rewi, a all fod yn sefydlog am hyd at 2 flynedd.
[Nodiadau]:
Wrth ferwi hydoddiant RNAseA o dan amodau niwtral, bydd dyodiad RNase yn ffurfio;Berwch ef ar pH is, ac os oes dyddodiad, gellir ei arsylwi, a allai gael ei achosi gan bresenoldeb amhureddau protein.Os canfyddir gwaddod ar ôl berwi, gellir cael gwared ar amhureddau trwy allgyrchiad cyflym (13000rpm), ac yna eu his-bacio ar gyfer storio rhewi.
Nodiadau
Gwisgwch y PPE angenrheidiol, cot labordy a menig o'r fath, i sicrhau eich iechyd a'ch diogelwch.
