Ultra Nuclease GMP-gradd
Cat Rhif: HC2016A
Mae UltraNuclease GMP-gradd yn cael ei fynegi a'i buro yn Escherichia coli (E.coli) trwy beiriannu a pharatoi'n enetig o dan amgylcheddau GMP.Gall leihau gludedd supernatant cell a lysate cell mewn ymchwil wyddonol, cynyddu effeithlonrwydd puro protein a gwella ymchwil swyddogaethol protein.Gall y cynnyrch hefyd leihau gweddillion asid niwclëig lletyol i radd pg, gan wella perfformiad a diogelwch cynhyrchion biolegol cymwysiadau gan gynnwys puro firysau, gweithgynhyrchu brechlynnau, a gweithgynhyrchu fferyllol protein / polysacarid.Yn ogystal, gellir defnyddio'r cynnyrch hefyd i atal clystyru celloedd mononiwclear gwaed ymylol dynol (PBMC) mewn therapi celloedd a datblygu brechlyn.
Darperir UltraNuclease ar ffurf adweithydd wedi'i sterileiddio, wedi'i guddio mewn byffer (20mM Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% glyserin), gydag ymddangosiad hylif tryloyw di-liw.Cynhyrchir y cynnyrch hwn gan ofynion proses GMP a'i ddarparu ar ffurf hylif.
Cydrannau
Gradd GMP UltraNiwclews (250 U/μL)
Amodau Storio
Mae'r cynnyrch yn cael ei gludo â rhew sych a gellir ei storio ar -25 ℃ ~ -15 ° C am ddwy flynedd.
Os caiff y cynnyrch ei agor a'i storio ar 4 ℃ am fwy nag wythnos, rydym yn argymell hidloy cynnyrch i atal halogiad microbaidd.
Manylebau
| Gwesteiwr Mynegiant | E. coli ailgyfunol gyda genyn UltraNuclease |
| Pwysau Moleciwlaidd | 26.5 kDa |
| pwynt soelectric | 6.85 |
| Purdeb | ≥99% (SDS-TUDALEN) |
| Clustog Storio | 20mM Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% glyserin |
|
Diffiniad Uned | Diffiniad un uned Gweithgaredd (U) yw faint o ensym a ddefnyddir inewid gwerth amsugno ΔA260 gan 1.0 mewn 30 munud mewn 2. 625 mLsystem adwaith ar 37 ℃ gyda pH o 8.0 (sy'n cyfateb i dreuliad cyflawn o37 μg DNA sberm eog yn oligonucleotides). |
Cyfarwyddiadau
1. Sampl Casgliad
Celloedd ymlynol: tynnwch y cyfrwng, golchwch y celloedd gyda PBS, a thynnwch y supernatant.
Celloedd crog: casglwch y celloedd trwy allgyrchiad, golchwch y celloedd â PBS, allgyrchydd ar 6,000rpm am 10 munud, casglwch y pelen.
Escherichia coli: casglwch y bacteria trwy allgyrchu, golchwch unwaith gyda PBS, centrifuge ar 8,000rpm am 5 mun, a chasglu'r pelen.
2. Triniaeth Sampl
Triniwch y pelenni celloedd a gasglwyd â byffer lysis yn ôl y gymhareb màs(g) i gyfaint(mL)1:(10-20), neu drwy ddulliau mecanyddol neu gemegol ar rew neu ar dymheredd ystafell (mae 1g o belenni cell yn cynnwys tua
109 o gelloedd).
3. Triniaeth Ensym
Ychwanegu MgCl 1-5mM i'r system adwaith ac addasu'r pH i 8-9.
Ychwanegu UltraNuclease yn ôl y gymhareb o 250 Uned i dreulio 1 g o belenni cell, deor ar 37 ℃ am fwy na 30 munud.Cyfeiriwch at y ffurflen “Amser Ymateb a Argymhellir” i ddewis yrhyd y driniaeth.
4. Supernatant Casgliad
Centrifuge ar 12,000 rpm am 30 munud a chasglu'r supernatant.
Sylwer: Os yw'r hydoddiant yn asidig neu'n alcalïaidd, neu'n cynnwys crynodiadau uchel o halen, glanedyddion, neudadnaturyddion, cynyddwch y dos ensym neu ymestyn yr amser triniaeth yn unol â hynny.
Conditi adwaith a argymhellirons
| Paramedr | Cyflwr Gorau | Cyflwr Effeithiol |
| Mg²+Crynodiad | 1-5 mM | 1-10 mM |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| Tymheredd | 37 ℃ | 0-42 ℃ |
| Crynodiad DTT | 0-100 mM | >0 mM |
| Crynodiad Mercaptoethanol | 0-100 mM | >0 mM |
| Crynodiad Cation Monovalent | 0-20 mM | 0-150 mM |
| Ffosffad lon Crynodiad | 0-10 mM | 0-100 mM |
Argymhellir Adwaith Amser (37 ℃, 2 mM Mg²+, pH 8.0)
| Swm UltraNuclease (Crynodiad Terfynol) | Amser Ymateb |
| 0.25 U/mL | >10 awr |
| 2.5 U/mL | >4 awr |
| 25 U/mL | 30 mun |
Nodiadau:
Gwisgwch y PPE angenrheidiol, cot labordy a menig o'r fath, i sicrhau eich iechyd a diogelwch!
