Ensymau UDG/UNG
Gall UDG (glycosylase DNA uracil) gataleiddio hydrolysis y cyswllt N-glycosidig rhwng y sylfaen uracil ac asgwrn cefn siwgr-ffosffad mewn ssDNA a dsDNA.Gall reoli llygredd aerosol yn hawdd ac mae'n addas ar gyfer systemau bioleg moleciwlaidd cyffredin megis PCR, qPCR, RT-qPCR a LAMP.
Manylebau
| Gwesteiwr Mynegiant | Ailgyfunol E. coliwith genyn glycosylase DNA uracil |
| Pwysau Moleciwlaidd | 24. 8kDa |
| Purdeb | ≥95% (SDS-TUDALEN) |
| Anactifadu Gwres | 95 ℃, 5 ~ 10 munud |
| Diffiniad Uned | Diffinnir un uned (U) fel swm yr ensym yr oedd ei angen i gataleiddio hydrolysis l μg dU sy'n cynnwys dsDNA mewn 30 munud ar 25 ℃. |
Storio
Dylid storio'r cynnyrch ar-25 ℃ ~ -15 ° C am ddwy flynedd.
Cyfarwyddiadau
1.Paratoi cymysgedd adwaith PCR yn ôl y system ganlynol
| Cydrannau | Cyfaint (μL) | Crynodiad terfynol |
| Clustog 10×PCR (Mg²+Plus) | 5 | 1 × |
| 25 mmol/LMgCl | 3 | 1.5 mmol/L |
| duTP(10 mmol/L) | 3 | 0.6 mmol/L |
| dCTP/dGTP/dATP/dTTP(10mmol/Leach) | 1 | 0.2 mmol / Trwytholch |
| Templed DNA | X | - |
| Primer1 (10μmol/L) | 2 | 0.4 μmol/L |
| Preimiwr 2 (10μmol/L) | 2 | 0.4 μmol/L |
| Polymeras DNA Taq (5 U/μL) | 0. 5 | 0. 05 U/μL |
| Glycosylase DNA Uracil (UDG/UNG), 1 U/μL | 1 | 1 U/μL |
| ddH₂O | Hyd at 50 | - |
Nodyn: Yn ôl y gofynion arbrofol, gellir addasu crynodiad terfynol dUTP rhwng 0.2-0.6 mmol / L, a gellir ychwanegu 0.2 mmol / L dTTP yn ddetholus.
2.Gweithdrefn ymhelaethu
| Cam beicio | Tymheredd | Amser | Beiciau |
| dU sy'n cynnwys diraddio templed | 25 ℃ | 10 munud | 1 |
| Gweithredu UDG, templed dadnatureiddio cychwynnol | 95 ℃ | 5 ~ 10 munud | 1 |
| Dadnatureiddio | 95 ℃ | 10 eiliad |
30-35 |
| Anelio | 60 ℃ | 20 eiliad | |
| Estyniad | 72 ℃ | 30 eiliad/kb | |
| Estyniad terfynol | 72 ℃ | 5 mun | 1 |
Nodyn: Gellir addasu'r amser adwaith ar 25 ° C o fewn 5-10 munud yn unol â'r gofynion arbrofol.
Nodiadau
1.Mae UDG yn weithredol yn y rhan fwyaf o glustogau adwaith PCR.
2.Dylid storio ensymau mewn blwch iâ neu ar faddon iâ pan gânt eu defnyddio, a dylid eu storio ar-20°C yn syth ar ôl eu defnyddio.
3.Gwisgwch y PPE angenrheidiol, cot labordy a menig o'r fath, i sicrhau eich iechyd a diogelwch!
