Un Cam RT-qPCR SYBR Green Premix
Cat Rhif: HCB5140A
Un Cam RT-qPCR Mae Syber Green Premix ar gyfer meintioli fflworoleuedd yn seiliedig ar liw SYBR Green I.Gan ddefnyddio paent preimio genyn-benodol, cwblheir trawsgrifiad gwrthdro ac adweithiau qPCR mewn un tiwb, gan ddileu'r angen am agor capiau dro ar ôl tro a gweithrediadau pibellau, gan wella effeithlonrwydd assay yn fawr a lleihau'r risg o halogiad.Ar gyfer samplau RNA, mae'r pecyn yn defnyddio Reverse Transcriptase sy'n gwrthsefyll gwres ar gyfer synthesis cDNA effeithlon a HotStart Taq DNA Polymerase ar gyfer ymhelaethu meintiol.O dan y system glustogi wedi'i optimeiddio, gall sensitifrwydd y pecyn fod mor uchel â 0.1 pg ar gyfer targedau sydd wedi'u mynegi'n uchel ac mor uchel ag 1 pg ar gyfer targedau a fynegir yn gymedrol.Mae'r pecyn yn addas ar gyfer ymhelaethu a meintioli samplau DNA.Mae'n galluogi canfod a meintioli asidau niwclëig o wahanol samplau o blanhigion ac anifeiliaid, celloedd a micro-organebau.
Cydrannau
| No | Enw | Cyfrol | Cyfrol |
| 1 | Clustog Uwch | 250 μL | 2 × 1.25 ml |
| 2 | Cymysgedd Ensym Uwch | 20 μL | 200 μL |
| 3 | Rhad ac Am Ddim H2O | 250 μL | 2 × 1.25 ml |
Amodau Storio
Dylid storio'r cynnyrch hwn ar -25 ~ -15 ℃ i ffwrdd o olau am flwyddyn.
Cyfarwyddiadau
Cyfluniad system 1.Reactiond
| Cydrannau | Cyfaint (μL) | Cyfaint (μL) | Crynodiad terfynol |
| Clustog Uwch | 12.5 | 25 | 1 × |
| Cymysgedd Ensym Uwch | 1 | 2 | - |
| Preimio Ymlaen (10 μmol/L)a | 0.5 | 1 | 0.2 μmol/L |
| Preimiwr Gwrthdroi (10 μmol/L)a | 0.5 | 1 | 0.2 μmol/L |
| Tampled RNAb | X | X | - |
| Rhad ac Am Ddim H2Oc | i 25 | i 50 | - |
Nodiadau:
1) a.Ty crynodiad preimiwr terfynol oedd 0.2 μmol/L, y gellid ei addasu hefyd rhwng 0.1 ac 1μmol/L fel y bo'n briodol.
2) b.Mae'r adweithydd yn hynod sensitif, gyda Chyfanswm RNA yn yr ystod o 1pg-1μg, a dangosodd profion samplau dynol y mewnbwn gorau posibl o 1 pg-100 ng, gan reoli am werth Ct cyffredinol yn yr ystod o 15-30 fel y bo'n briodol.
3) c.Argymhellir defnyddio 20μL neu 50μL i sicrhau dilysrwydd ac atgynhyrchedd ymhelaethu genynnau targed.
4) d.Paratowch yn y fainc hynod lân a defnyddiwch awgrymiadau di-waddod niwcleas a thiwbiau adwaith;argymhellir awgrymiadau gyda chetris hidlo.Osgoi croeshalogi a halogiad erosol.
2.Rhaglen ymateb
| Cam beicio | Temp. | Amser | Beiciau |
| Trawsgrifiad o'r cefn | 50 ℃a | 6 munud | 1 |
| Dadnatureiddio cychwynnol | 95 ℃ | 5 munud | 1 |
| Adwaith ymhelaethu | 95 ℃ | 15 eiliad | 40 |
| 60 ℃b | 30 eiliad | ||
| Cam cromlin toddi | Rhagosodiadau Offeryn | 1 | |
Nodiadau:
1) a.Gellir dewis y tymheredd trawsgrifio cefn rhwng 50-55 ° C yn ôl yr anghenion arbrofol.Ar gyfer samplau DNA, gellir hepgor y broses trawsgrifio o chwith.
2) b.Mewn achosion arbennig, gellir addasu'r tymheredd anelio / estyn yn ôl y gwerth primer Tm, argymhellir 60 ° C.
Nodiadau
1. Mae'r cynnyrch hwn ar gyfer defnydd ymchwil yn unig.
2. Gweithredwch gyda chotiau labordy a menig tafladwy, er eich diogelwch.
