Amlblecs Un Cam RT-qPCR Premix-UNG
Cat Rhif: HCB5145A
Pecyn PCR meintiol amlblecs yw RT-qPCR Probe Kit (UDG Plus) sy'n seiliedig ar RNA fel templed.Yn y broses o'r arbrawf, cynhaliwyd trawsgrifiad gwrthdro a PCR meintiol yn yr un tiwb, a oedd yn symleiddio'r gweithrediad arbrofol ac yn lleihau'r risg o halogiad.Yn y pecyn hwn, cafodd y llinyn cyntaf cDNA ei syntheseiddio'n effeithlon gan Reverse Transcriptase sy'n gwrthsefyll gwres a'i chwyddo'n feintiol gan HotStart Tag DNA Polymerase.Mae'r pecyn yn bennaf yn cynnwys clustog MP wedi'i optimeiddio, cymysgedd ensymau, ac ati. Mae'r toddiant byffer eisoes yn cynnwys Mg2+a dNTP.Yn ogystal, ychwanegir y ffactorau a all atal y mwyhad PCR amhenodol yn effeithiol a gwella effeithlonrwydd ymhelaethu ar adweithiau qPCR lluosog, a all sicrhau effeithlonrwydd ymhelaethu a chynnal hyd at adwaith mwyhau lluosog.Ychwanegwyd y system dUTP/UDG i atal y risg o halogiad erosol yn effeithiol.
Cydrannau
1. byffer
2. Cymysgedd Ensym
Manyleb
| Cychwyn Poeth | Cychwyn poeth adeiledig |
| Dull canfod | Canfod preimiwr |
| dull PCR | Un cam RT-qPCR |
| Polymerase | Taq DNA polymeras |
| Math o sampl | DNA |
Amodau Storio
Mae'r cynnyrch yn cael ei gludo â rhew sych a gellir ei storio ar -25 ~ -15 ℃ am flwyddyn.Dylai osgoi amlrhewi-dadmer.Argymhellir arbed ar wahân.
Cyfarwyddiadau
1.Adwaith System
| Cydrannau | Cyfaint (μL) | Crynhoad Terfynol |
| Clustogi 2 × MP | 12.5 | 1 × |
| Cymysgedd Ensym | 1 | - |
| Cymysgedd preimio/probe (2.5 μM) | 3 | 0.3μM |
| Templed RNA | 1-10 | - |
| RNase Rhad ac am Ddim H2O | i 25 | - |
Nodiadau:
Gwnewch yn siŵr eich bod yn cymysgu'n dda cyn ei ddefnyddio, gan osgoi swigod gormodol a achosir gan ddirgryniad treisgar.
a.Crynodiad preimio: Cymysgedd preimio gan gynnwys paent preimio amlblecs, yn dibynnu ar y sefyllfa, efallai y bydd y crynodiad preimio gorau posibl rhwng 0.l a 1.0μM.
b.Crynodiad chwiliwr: Cymysgedd chwiliwr gan gynnwys grŵp fflwroleuol gwahaniaeth labelu chwiliwr amlblecs, yn dibynnu ar y sefyllfa, efallai y bydd y crynodiad chwiliwr gorau rhwng 0.05 a 0.5μM.
c.Gwanhau templed: Mae qPCR yn sensitif iawn ac argymhellir gwanhau'r templed.Mae'r gwerth rheoli Ct yn addas rhwng 20 a 35.
d.Paratoi system: Paratowch yn y bwrdd gweithio hynod lân, a phibydd a thiwb adwaith heb weddillion niwcleas;argymhellir defnyddio'r pen gwn gydag elfen hidlo.Osgoi croeshalogi a halogiad erosol.
2. Beicio OptimizedProtocol
| Beicio cam | Temp. | Amser | Beiciau |
| Trawsgrifiad o'r cefn | 50 ℃a | 20 munud | 1 |
| Cychwynnol-dadnaturiad | 95 ℃ | 5 munud | 1 |
| Adwaith ymhelaethu | 95 ℃ | 15 eiliad |
40-45 |
| 60 ℃ b | 30 eiliad c |
Nodiadau:
a.Trawsgrifiad gwrthdro: Gall y tymheredd ddewis 42 ° C neu 50 ° C.
b.Adwaith ymhelaethu: Mae'r tymheredd yn cael ei addasu yn ôl gwerth Tm y paent preimio a ddyluniwyd.
c.Caffael signal fflworoleuedd: Gosodwch y weithdrefn arbrofol yn unol â gofynion y llawlyfr offeryn.
Nodiadau
Gwisgwch y PPE angenrheidiol, fel cot labordy a menig, i sicrhau eich iechyd a diogelwch.
